Articles

Mecanismos de resistencia para inhibidores CCR5

O traballo descrito neste manuscrito ten como obxectivo caracterizar as vías de resistencia aos inhibidores CCR5. Nun primeiro paso, desenvolvemos unha proba fenotípica clonal que nos permite, por unha banda, identificar o tropismo viral e, por outra banda, medir a resistencia aos inhibidores CCR5. Os virus do tropismo R5 ou X4 que representan o 0,4% dunha mestura de poboacións virales son detectables por esta proba, demostrando así a súa sensibilidade. Ademais, grazas ao seu enfoque clonal, esta técnica permite diferenciar os virus do dobre tropismo das poboacións virales mixtas. Posteriormente, estudamos o impacto das mutacións nas rexións variables da proteína GP120 do sobre virus VIH-1 sobre a resistencia aos inhibidores CCR5. Para iso, xeramos virus resistentes a través de illas CC1 / 85 e SAL, en presenza de concentracións de baixo inhibitorio de Maraviroc (MVC) e Vicriviroc (VCV). Despois de algúns pasos do virus CC1 / 85 en presenza de MVC, algúns apareceron en diferentes rexións do GP120. Posteriormente, seleccionamos tres mutacións nos dominios variables do GP 120, V169M en V2, L317W V3 e I408T en V4 para construír virus que conteñen mutacións simples, dobres e triples para avaliar a contribución das mutacións individuais. Ou combinado co fenotipo de resistencia .. Determinamos a sensibilidade de cada mutante a MVC e VCV, a porcentaxe de infectividade eo tropismo viral en relación ao fenotipo salvaxe. Todos os mutantes conservaron o Tropismo R5 e mostraron unha diminución da infectividade en relación ao control. Os nosos resultados mostraron que os mutantes con mutacións V4 (i408t) tiveron o maior impacto sobre a susceptibilidade ao MVC. Finalmente, queriamos avaliar a actividade antiviral dun novo inhibidor CCR5, VCH-286 con outros inhibidores CCR5 como MVC e VVC, así como as súas interaccións con medicamentos representativos de diferentes clases de ARV Antireetrovirals. Clínica para tratar o VIH / SIDA., Para avaliar se estas drogas poderían utilizarse no mesmo réxime terapéutico. Primeiro avaliamos de forma independente a actividade antiviral dos tres inhibidores CCR5: VCH-286, MVC e VVC. Posteriormente avaliamos as interaccións VCH-286 con MVC e VVC. Finalmente evaluamos as interaccións VCH-286 con outras drogas antirretrovirales. Estes estudos demostraron que o VCH-286 é un poderoso inhibidor de CCR5 con actividade antiviral in vitro da orde Nanomolar e as interaccións de medicamentos favorables coa maioría dos arvs como a transcriptasa inversa, a proteasa, os inhibidores integrados. E a fusión empregada na clínica para tratar o VIH / SIDA e interaccións que van dende o antagonismo Synergy con inhibidores CCR5. Os nosos resultados mostran que a plasticidade do sobre viral de VIH-1 ten repercusións sobre a resistencia aos inhibidores CCR5, o tropismo eo posible uso destas moléculas en combinación con outras moléculas que pertencen á mesma clase.

O traballo descrito en Este manuscrito estaba situado para caracterizar os camiños de resistencia aos inhibidores CCR5. Desenvolvemos por primeira vez un ensaio fenotípico para identificar o tropismo viral e medir a resistencia aos inhibidores CCR5. Esta detección de ensaio r5 virus trópicos X4 cando representan un 0,4% nunha mestura de poboacións virales, demostrando a súa robustez e sensibilidade. Con base no seu enfoque clonal, este ensaio pode diferenciar os virus verdadeiramente trópicos de poboacións virales mixtas. Logo estudaremos o impacto das mutacións nas rexións variables da proteína sobre sobre GP120 do virus VIH-1 sobre a resistencia aos inhibidores CCR5. Para iso, os virus resistentes foron xerados por paso de CC1 / 85 e Ballates BAL en presenza de concentracións sub-inhibitorias de Maraviroc (MVC) e Vicriviroc (VCV). Seguindo algúns pasos do virus CC1 / 85 en presenza de MVC, identificáronse algunhas mutacións en diferentes rexións do GP120. Seleccionamos aínda máis tres mutacións nos dominios variables de GP120, V169M en V2, L317W en V3 e i408T en V4 para construír conteñen virus individuais, mutacións dobres e triples para avaliar a contribución de mutacións combinadas de ouro individual no fenotipo de resistencia a MVC e VCV .. Determinamos a sensibilidade de cada mutante a MVC e VCV, o tropismo ea porcentaxe de infectividade en comparación co tipo salvaxe. Os nosos resultados mostraron que as secuencias que levan mutacións no dominio V4 i408t, tiveron o maior impacto sobre o sospeitoso de MVC.Finalmente, destinamos a avaliar a actividade antiviral dun novo inhibidor de CCR5, VCH-286 ea súa interacción con medicamentos representativos de diferentes clases de antirretroviral (ARV) como inhibidores de transcriptas inversa, inhibidores de proteasas, inhibidores de integración e inhibidores de fusión usados en clínica a Tratar o VIH / SIDA e outros inhibidores CCR5 como MVC e VVC para avaliar se estas drogas poderían usarse xuntos dentro do mesmo réxime de tratamento. Para responder a esta pregunta, avaliamos por primeira vez a actividade antiviral dos tres inhibidores CCR5: VCH-286, MVC e VVC. A continuación, avaliamos as interaccións de VCH -286 con MVC VVC. Finalmente valorou as interaccións de VCH -286 con outros fármacos anti-retrovirais Estes estudos mostraron que VCH-286 é un inhibidor potente do virus R5 con actividade antiviral na gama nanomolar e interaccións medicamentosas favorables coa maioría dos anti-retrovirais, como transcriptasa inversa, proteases, Integrase e inhibidores de fusión empregaban clínicamente para tratar o VIH / SIDA. As combinacións de inhibidores CCR5 teñen interaccións que van desde a sinerxía ao antagonismo. Os nosos resultados mostran que a plasticidade do sobre viral do VIH-1 afecta a resistencia aos inhibidores CCR5, ao seu tropismo e á potencial combinación destes medicamentos.

Deixa unha resposta

O teu enderezo electrónico non se publicará Os campos obrigatorios están marcados con *