Articles

Base de Données Sur Les Brevets Canadiens / Sommaire du Brevet 2142277

WO 94/04168 21 4 ~ 2 2 7 7 7 p. Estas proteínas muito termolabile são desnaturadas, portanto, precipitadas e parcialmente perdidas do soro de leite quando altas temperaturas de pasteurização são utilizadas.
Nossos estudos também mostraram que a administração de S (N-butil)
Sulfoximina de homocisteína, que Reduz a glutationa esplênica na metade, reduziu significativamente a resposta imune humoral dos ratos alimentados com proteínas de Whey. Isto foi tomado como uma prova adicional para o importante papel da glutationa no efeito de imunoenanciamento da proteína dietética do soro de leite (32). O tecido de glutationa de tecido pode ser aumentado por uma administração de gama-glutamil-cisteína . Intracelular, glutationa aumentou no rim por cerca de 50%, 40-60 minutos, após subcutânea (s. C. C. C. C. C.) Infreção em camundongos, retornando a controlo
valores 2 horas depois (33). O gama-gama-glutamilcysteine é transportado intacto para as células, e serve como um substrato para glutatione synthetase (33). Avanços no sequenciamento de aminoácidos de proteínas alimentares permitidos para investigar a ocorrência de glutamilcysteine grupos em wheky, proteína e a possível relação com a promoção da glutationa. De fato, o concentrado de proteína de soro de leite bovino contém quantidades substanciais de grupos glutamilcisteína, ao contrário de casos, que não aumenta o tecido Glutationa quando alimentada a ratos (35). Os grupos glutamilcisteína estão localizados principalmente no soro da fracção de albumina (seis grupos / molécula). Glutamylcysteine Grupos são extremamente raros em proteínas comestíveis de animais e plantas. Pesquisa extensa de todos os dados disponíveis sobre o sequenciamento de aminoácidos de proteínas comestíveis revela que o grupo Glu-Cys com um elo de dissulfeto é de fato limitado a parte da proteína do soro de leite, e ao ovomucoid fração de branco de ovo que contém 2 desses grupos em um
30.000 mol.wt.molecule (31). Nossos dados recentes (31) indicam ainda que a resposta humoral e imune é maior em camundongos alimentados proteína dietética de soro de leite e concentrado exibindo a maior solubilidade (conformação de alta qualidade) e, mais importante, uma maior parente e concentração da albumina de soro bovino termolabile (- > 10%) e imunoglobulinas. Além disso, os ratos alimentados com este tipo de soro de leite e concentrado de proteína exibem níveis mais altos de tecidos GSH. O

Wo 94/04168 2 1 4 2 2 7 7 PCT / CA93 / 00309
– 17 –
Glutamilcysteine. Grupos (raro na proteína alimentar) e a ligação específica e intramolecular Conforme relacionado à conformação indenatural, são consideradas fatores-chave na atividade de promoção de glutationa da mistura de proteínas.

experiências recentes no Japão mostraram que as células baço de BALB / C Os ratos masculinos alimentaram 25g de nossa proteína de soro de leite indenatural
concentrado (WPC) (para o qual o nome da marca “imunocal” foi aplicado) por dieta de L0OG por 4 semanas. Aumento do SRBC in vitro e um alto teor de l3t4 + células
(12,58 x 106 ~ 1,36) do que os ratos alimentados com uma dieta isocalórica com 25g.
Pure Casein / 100g. dieta (3,69 x 106 ~ 0,50). Da mesma forma, o speen
L3T4 + / Lyt – 2+ relação foi de 1,36 ~ 0,07 em ratos alimentados com WPC não-cuidadosos e 0,55 + 0,07 em controles alimentados com caseína (p < 0,001 ). Por outro lado, as concentrações relativamente altas do soro termossensível
de albumina e imunoglobulinas resultantes do baixo grau de pasteurização de leite em nosso WPC, podem refletir mais de perto o padrão de leite cruel. Estes dados emprestam apoio à hipótese
que o Thermolabile Glu-Cys contendo proteínas, tais como o soro de albumina em conformação indenatural são elementos cruciais para a atividade biológica do concentrado de proteína de soro de leite.
Proteína de soro de leite bovino adequado Concentrado (WPC) foi preparado pelo “Serviço de Recherche Sur Les Aliments Du
Ministério de 1’Agriculture Du Quebec” Em St-hyacinthe, Quebec,
Canadá, com as seguintes características: proteína pura conteúdo
75% (o resto principalmente lactose, alguma gordura e umidade): Solubilidade e índice: (pH 4,6); 99,5%. Composição de proteína A partir do soro total de soro de leite de proteína medido por poliacrilamida Eletroforese Gel (31) foi:
Beta-lactoglobulina 59.1 ~ 4.0: Alfa-lactalbumina: 6.6 ~ 0.7; Albumina de soro: 9,7 T 1.0; Imunoglobulina 24.6 ~ 2.6 (média ~ SD). O índice de solubilidade deve ser preferencialmente acima de 99%.
O soro Albumina de cerca de 10% da proteína total do soro de leite foi quase duas vezes o valor correspondente encontrado em outros comercialmente, os concentrados disponíveis de proteína de soro de leite que foram examinados. Acredita-se que um nível de albumina sérico > _ 10% é altamente vantajoso para melhorar o sistema imunológico.
A
21 4.2 2 7 7 p ~ ‘/ ca93 / 00309
wo 94/04168
– 18 –
A albumina sérica inclui uma quantidade substancial de glutamyl
cisteína que é um substrato de síntese de glutationa no
corpo. O papel da glutationa é discutido em detalhe ou
Artigo “A atividade biológica de whey dietético indenatural e proteínas: Papel da glutationa”, Clin. Investir med 14: 296 – 309,
(31).
imunoglobulina na faixa de cerca de 25 a 30% do total de soro de leite e proteína também é importante. Pasteurização a 72’C por 13 segundos, resultou em um nível de imunoglobulina de 28 ~ 2%. Nós encontramos o possível para alcançar um nível de albumina sérico tão alto quanto 14 ~ 1% com leite pasteurizado a 72’c por 13 segundos.

Sobre a análise bacteriológica sem Staph, Salmonella, B Cereus, ou e coli foram isolados no WPC preparado pelo
“Serviço de Recherche Sur Les Aliments Du Ministério de
1 ‘Agricultura du Quebec” ou na amostra Pasteurizada a 72’ C para
13 segundos. Outras amostras foram preparadas aquecendo o leite para
63’c por 30 minutos, com bons resultados.
30m1 de sangue heparinizado pode ser usado para determinar o teor de glutationa de fosfato mononucleado de sangue em tamponado ajustado para que haja 107 células por tubo. Depois de Centrifugação 900 ml de água é adicionado ao pellet para lisonha todas as células. Para cada alíquota é adicionado 30% de ácido sulfosalicílico para uma concentração final de 3% IN.L ML. Após 15 minutos de incubação, as amostras são centrifugadas, e o sobrenadante claro é usado para o ensaio bioquímico de acordo com o método de Anderson. Os valores são expressos como nanomol (NMOL) por células GSH / 107. Os subconjuntos do linfócitos do sangue podem ser determinados por citometria de fluxo.
A proteína sérica total, incluindo as albixas e as imunoglobulinas podem ser determinadas pelo método Biuret. O nível de imunoglobulina A (IGA), imunoglobulina G (IgG) e Imunoglobulina M (1GM) pode ser medido por imunoneflometria.
a presença de grupos glutamilcisteína no soro albumina
componente do O concentrado de proteína de soro de leite é considerado um fator chave no fator de promoção de glutationa e imunoenhancagem e imunocinanciamento da mistura de proteínas do WPC desenfreado. Nossos estudos de laboratório indicam que os concentrados de proteína de soro de leite ‘:
wo 94/04168 2 1 4 2 2 7 7 p ~ / ca93 / 00309
– 19 –
Outras fontes não Produza atividades biológicas significativas, apesar de terem exibido uma eficiência nutricional semelhante. A porcentagem de concentração de albumina sérica nestes produtos é (como média
~ SD) respectivamente: 4 ~ 1 em promode (laboratórios de Ross), 4 ~ 1 de
ALACEN 855 (Leiteria da Nova Zelândia), 4.8 ~ 1 em lacprodan – 80
(produzido a partir de 1989 por Danmark Protein), 4 ~ 0.1 em SAPRO (SAPRO, MONTREAL), 4 ~ 1 em SavorPro – 75 (queijo dourado, CA, EUA), 5 ~ 1
em Bioisolate (Lesueur, Isolados, Minneapolis) e 4.3 ~ 1 no Promix (Dumex, Quebec). Da mesma forma, o conteúdo da outra proteína de termolabile, imunoglobulina, foi cerca de metade do valor da WPC não-necessária utilizada neste estudo. O que os resultados indicam que proteínas de soro de leite não decorrentes de
O reabastecimento de glutationa nos imunocitos poderia representar um adjuvante para outros fanas de terapia.

Historicamente, até agora, as bactérias e esporos no leite são reduzidos por tratamento térmico (pasteurização). A fim de ser eficaz, esse método produzia inevitavelmente desnaturação e, portanto, subsequente precipitação e perda na coalhada de uma quantidade substancial da maioria dos termolabile e presumida de frações biologicamente activas de albumina sérica e
Imunoglobulina.
Nosso objetivo é obter. Um concentrado de proteína de soro de leite (WPC) contendo as proteínas em proporção e conformação, o mais próximo possível do leite cru, compatível com o leite cru padrões de segurança de conteúdo bacteriano. Até agora, nós utilizamos o menor nível aceitável de tratamento térmico de leite para preservar a proteína do soro de chá termolabile.
Uma alternativa ao tratamento térmico é um método baseado em microfiltração de membrana. Utilizando Bactocatch (Alfa-Laval Ltd.
Scarborough, Ontário) Podemos obter um permeado por microfiltração especial de membrana do leite desnatado cujas bactérias e conteúdo foi reduzida a menos de 0,5% da entrada original
Níveis.
Este permeado é então tratado com Rennet e as proteínas
no sobrenadante do soro de leite concentrado por um procedimento leniente para obter o concentrado de proteína de soro de leite desanimado. Os
Wo 94/04168 PCT / CA93 / 00309
21 42277
– 20 – O conceito de microfiltração de membrana é uma alternativa ao calor de tratamento de leite como uma maneira apropriada de preservar o calor labilatório
Whey Proteins, embora técnicas e equipamentos possam ser melhorados no tempo. Tabelas 5 e 6 ilustram esquematicamente um processo para produzir
Um Melhorado Undenature WPC que nos referimos sob a marca registrada Imunocal.A Tabela 7 é um gráfico comparativo mostrando as características de imunocal em comparação com as fontes de WPC e mostrando também as conseqüências de 3 semanas dietética e tratamento.
Nós concluímos como resultado do nosso trabalho Esse concentrado de proteína de soro de leite (WPC) é de valor na profilaxia de cânceres, tais como câncer quimicamente induzido, tipicamente como o câncer de cólon, que é promovido por carcinogênicos, como dimetil-hidrazina. Também é útil para o tratamento de pacientes com células cancerígenas, como câncer quimicamente induzido, para inibir a replicação de tais células. Um aproxima a dosagem para os seres humanos está na faixa de cerca de 8 a 40 gramas diário e, de preferência, 20 a 40 gramas diariamente. É particularmente benéfico para administrar 30 a 40 gramas por dia. Foi criada que é particularmente vantajoso usar o WPC, tendo uma albumina sérica em concentração de pelo menos 10% T 1. A albumina sérica deve ser de pelo menos 9% e mais preferencialmente BR> 9.5 $.
Como mostra a literatura publicada, os tumores do cólon – induzidos por dimetil-hidrazina em experimentos com ratos são semelhantes de câncer do cólon em humanos em termos do tipo de lesão e resposta à quimioterapia. (27,28).
A descoberta que o rácio de granulócitos / linfócitos (g / l) é aumentado em casos de câncer terminal e correlatos com a condição do paciente (38) levou um interesse nos fatores
que pode influenciar este parâmetro importante.
wo 94/04168 PCT / CA93 / 00309
21 x2277 – 2 ~ –
Tabhe 5
Uma representação esquemática do processo para produzir
O WPC que nos referimos a A8 Il ~ Iunocá
Leite de rap
1
Skimmed a 35 ° C ~ – ‘creme
1
leite desnatado pasteurizado a 63 ° C durante 30 minutos.
1
a 38 ° C: adição de RENNET (20 ml / 100 quilos), permitindo a agitação para resolver a baixa velocidade.
Curd
quando
1
Filtrado Com algodão de queijo para remover detritos (45 minutos):
1
A 40-CC Ultrafiltraation (Romecan Ufsi, Membrana de Polysulphone, Corta 50.000, Diâmetro de Porto 0,06 de uma polegada, superfície 3 mz).
. Diafiltração para lavar os sais e lactose.
Ocendente de proteína WHEV
1
Pasteurizado a 63 ° C por 30 minutos.
1
a 40 ‘C: Lyopilização (16 horas).
1 e concentrado de proteína WHEV. Pó:
Wo 94/04168 ~ ~ PCT / CA93 / 00309
– 22 –
Tabela 6
A88ay de Produto da Tabela 5
Poliacrilamida Sorum Albumina B-Lactoglobulina
Gel Eletroforese 10 ~ 1% 57,8 ~ 0,9%, A-lactalbumina Imunoglobulina
11.4 ~ 0,6% 22 ~ 0,7% Por exemplo, Depleção de granulócitos utilizando extracorpórea e circulação foi encontrada para reduzir significativamente o tamanho de um
Tumor transplantado em coelho (39). Estudos experimentais recentes
em camundongos sugeriram a possibilidade de o segundo parâmetro de
A equação de g / l poderia ser influenciada por meios alimentares. Ratos alimentados com o concentrado de proteína de soro de leite preparado de modo a preservar a maioria da molécula termosensitiva de soro de leite, como albuminas séricas na sua forma indígena, exibiram uma resposta imune reforçada (35) manifestada, em Parte, por uma ‘aumento da resistência à infecção pneumocócica (40,1) e indução de carcinogênio de câncer
(1).
Este é o produto que nos referimos como WPC não-cuidadosos. Aumento do WPC Reatividade de camundongos alimentados com WPC semenaturada foi encontrado para persistir em células ingênuas transferidas in vitro (36). A albumina sérica contém seis grupos glutamilcisteína (31), portanto, fornece o substrato específico para a síntese de glutatione

(33, 34) (GSH). Esses grupos são extremamente raros em proteínas alimentares
(31).
Z ~~~ Z7 ~ 23
Wo 94/04168 PCT / CA93 / 00309
~ ~ ~ ~ O ~
AR S ~ 0 0 de, A
NL O IIIII de
X e
Oo.-IT0 OO SREH N O OOOO ~ “~ Oooo
I pl 1 1 1 i
~ ~ ~ ~ i ~
01 10o
B ~ a… Em
X
3
A
Ewcrt ~ 0
-1 ~ i -1
00Con 01
Owo + i + i + i +1 + i + i + i + io
O ~
~ ‘1g1c d’ f ‘ 1f ‘~ 10 n7
+’
H VX ‘~ Ro
Giu .n
~ E
AA ~
e
N ~! ~! ~
~ ~
i5 c) i. ~ o e’w0 ~ e1r1eh q
x o r-1 + i + i + ~ + i + i + i + i 1 rl
q
q de
ti1d’f ~ n ‘c1 r.

n rle ~ ~ -1rlrl ~ -i

W e O ~ ~ ~ O
Tll ~ i rie-1n r1rle-i
cm + i + i + i + i + i + i + 1 g
w ‘o
v ~ ~ ~ d .r ao ~ ~ ~ ..- iu
, N O
E ~ O d ‘O
~
O ~ ~ ~ ~ ~ ~
G
– W, O RLC’1N N R-IE-1 ri
em ~ on of rlo ~ i
v ta, co
o 3 ~ ‘nn e-1n n rl \, -1
n
b ~ .. ~ u
O
Geu ~ ~ p v
.-I
‘+ + + + + + + n ~ ro
A ~ W: ‘Eu ~ eu i i + i s;
q o o c o c o ~ ~ c
‘~ ~ ~ ~ g
X ~, O 1 ~

A Ro ~ i ~
~
. w
N e ~ ~ ~
H ~ ‘.,’ DP DP DPDP
~ ‘~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ x ~ ~ ~ ~ ~ 000 1 ~ 1
AA ~ ~ I O ~ O ~ O ~ O ~ O, O, O, O, O, ~ v ~ SW ~ C
~ ,,
W ~ ~ ~ ~ ~
~ s – ~ OD ~
~ W ~ ~ p ~ e0 ~ nv w ~ g!
o b, ~
0 n
Ju 1 ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ Testre ~ Ior ~ l
~
g
i 1
~ C4tjt! ~ Zg v ~
w
O 0.
u b i p.~
o ‘c! ~ oncm
~
o ~ u
P, ~ em
N ~ ~ v ~ v ~~ U ~ ~ nm .f i VO 94/04168 21 4 ~ 2 7 7 PCT / CA93 / 00309
– 24 –
O efeito favorável do WPC indenatural em experimentos de animais
foram associados com uma elevação sustentada de glutatione de tecido de tecido. (41). No entanto, esse efeito foi mais evidente do que as células do baço durante a expansão clonal orientada ao antígeno da piscina linfócitos (32): estas experiências indicam claramente que a atividade de melhoramento imune, ou seja, aumento do linfócito
A proliferação de WPC indenatural dietética está relacionada com a produção de GSH no linfócitos em linfócitos em comparação com uma redução real de GSH observada em controles alimentados por caseína, durante um desafio antigênico similar (32). GSH, um tripéptido
Thiol encontrado em praticamente todas as células, é o principal radical livre
limpador de oxigênio (42). Mais especificamente, o teor de gs dos linfócitos é correlacionado com a capacidade dos oxidantes e os tioles para modular sua proliferação (43). Neste sentido, a modulação de gs intracelular pode afetar a responsividade imune
(44, 45). Estas experiências indicam ainda que o efeito aumentador de proteínas dietéticas sobre os linfócitos é particularmente Quando o estímulo ~ antigênico para a proliferação ativa é presente.

No entanto, esta relação exclusiva entre a produção de wpc indenaturada dietética e a produção de linfócitos também é manifestada em camundongos normais inimunizados. Após três semanas de regime dietético, os pesos do baço, os pesos, bem como o peso do baço: relação de peso corporal de camundongos alimentados com 20g ou dieta WPC / 100g não parecidos por 30g foram moderadamente maiores do que os valores correspondentes de ratos Alimentou dietas nutricionalmente equivalentes e contendo 20G ou 30g de casein, proteína de soja ou peixe e dieta protéica / 100g (46). Mais especificamente, o número de células
por baço foi maior em ratos alimentados com WPC não-cuidadosos do que os valores correspondentes em camundongos alimentados com quantidades equivalentes de caseína, trigo, soja e proteína de peixe (35).
Um estudo mais detalhado revelou que o número de células nucleatadas no baço de camundongos alimentados com uma dieta WPC não-necessária de 25% foi significativamente maior do que os valores responderados em camundongos alimentados com uma dieta de caseína de controle 25%. Curiosamente, as mudanças observadas são especificamente relacionadas à duplicação da população de células T:
particularmente a subpopulação L3T4 aumentou quatro vezes, enquanto a
A ‘(O 94/04168 ~ ~) 7 7 PCT / CA93 / 00309
– 25 –
O número de células B foi inalterado (36). Esta descoberta posterior é consistente com outros estudos que mostram que os efeitos de WPC não-cuidadosos são Não exercido centralmente na taxa de produção primária de linfoctye B na medula óssea e que o efeito imune e aprimoramento é específico; y visto em resposta a antígenos de células T (47).
O efeito descrito acima do WPC desenfreado nos linfócitos pode explicar o efeito inibitório observado de
Essa forma de regime alimentar em tumores experimentais. Recentes experiências mostraram que a alimentação contínua de WPC semenaturar A dieta inibe o desenvolvimento (número e tamanho) de tumores em
O cólon de ratos ao longo de um período de 24 semanas de tratamento de dimetil-hidrazina (DMH). este O efeito antitumorido pode ser causado pelo aumento da resistência de células alvo ao carcinogênio e / ou um efeito inibitório direto da WPC inegurada dietética no tumor e no crescimento. Uma série subseqüente de experimentos (2) onde os animais foram alimentados dieta laboratorial padrão para as primeiras 20 semanas de DMH e, em seguida, mudou para a dieta WPC não-necessária para as restantes 8 semanas de tratamento de DMH, indicam claramente Um efeito inibitório

de alimentação de WPC não-eatured em células cancerígenas.
Vale ressaltar que o efeito de aumento do WPC indenaturado
sobre os tecidos linfóides periféricos de animais normais não é associado a mudanças significativas no total número de sangue e linfócitos (36,46). A ausência de variação no número total
de linfócitos circulantes também foi observado em humanos saudáveis
(Otsuka Pharmaceutical Co. Ltd.).
A indução de síntese de gsh de celulares por Glutamylcysteine Grupos de WPC semenaturar Pode constituir outro efeito interessante deste produto em pacientes com câncer. De fato, a introdução do sistema de entrega de cisteína OTZ
(Ozotiazolidina – 4 – Carboxilato), enquanto aumentava os níveis de GSH em células normais, foi encontrada para resultar em inibição de feedback do ciclo de GSH Células tumorais (5).
Um ensaio clínico foi organizado no Japão por Otsuka
Pharmaceutical Co. Ltd. A equipe clínica foi dirigida pelo Dr.
Masakazu Adachi. O ensaio clínico envolveu cinco pacientes que tinham um câncer de terminal de etapa avançado. Um relatório resumido é de WO 94/04168 21 4 2 2 7 7 PCT / CA93 / 00309
– 26 –
R reproduzido abaixo como Tabela 8 e os dados laboratoriais dos hematócitos e os níveis de glutationa são dados Tabela 9 para quatro dos pacientes.O nível de dosagem para cada paciente foi de 30 gramas por dia. Como mostrado na Tabela 8, o número de linfócitos em todos os pacientes é aumentado durante a adivenação do soro de leite de proteína. Dois outros pacientes com um palco avançado de
se retiraram do julgamento por causa de problemas digestivos. A investigação anterior relatou que uma vez que o número do linfócito caiu em pacientes com câncer, a recuperação do número de linfócitos para um nível normal pode não ser possível. O aumento do número de linfócitos é importante devido à sua potencialidade para melhorar a relação G, IL. Os resultados mostrados nas Tabelas 8 e 9 podem ser contrastados com indivíduos saudáveis que (com base Em testes de 14 indivíduos), geralmente têm uma glutationa pi! ~ 1 nível de 0,34 ~ 0,02, um nível de Glutationa RBC de 0,066 ~ 0,006, uma WBC de 6640 ~ 1700, um número de linfócitos de 2200 ~ 460 A Ratio G / L de 1,85 ~ 0,45 e
PLT 25.4 T 3.3
A Tabela 10 mostra a análise bacteriológica e também a distribuição de proteínas e solubilidade do WPC não-eated usado em testes Descrito nas Tabelas 8 e 9.
Em conclusão, parece que a administração de WPC com os pacientes com câncer aumenta o número de linfócitos do sangue e diminui a relação g / l. A concentração de linfócitos, muito baixa, no início, tende a retornar em relação aos valores normais. De acordo com a base de evidência experimental previamente descrita (38,39), o efeito observado do WPC sugere a inibição do crescimento das células cancerígenas.
em testes de WPC não-eated subsequente àqueles descritos em Tabelas 8 e 9, as seguintes observações foram feitas:
(1) O paciente F tinha tumores sólidos em seu abdome que poderia ser identificado pelo exame físico e ela recebeu quimioterapia. Ela teve dificuldade em consumir o desarranjo
WPC e estava prestes a se retirar do tratamento. No entanto, foi descoberto que, desde que ela estava tomando o wpc indenatural, o número de linfócitos aumentou, e o número crescente de marcadores de tumor aumentou sinais de diminuição.
WO 94/04168 PCT / Ca93 / 00309
-27-
AA

~ Oo ‘
~
~ ,, 9 ~ ~ ~
a > ~ C, >
W Ev Ow ~
O eh en O, =
~ – ~
v ~ WV ‘.. ~. ~. ~. = WV’ ~ A
A
w,

M ~ e

TPP
Ah
H
Oooo
~
_ T 1 TT 1
~
_t
m
Oooo
H
1
~
“?? 1 TT

~ ~
~
. CE
C,

Br> N

c ~ t
~
ap ~ \ u, v er ~ A
c7 ace ‘.. um
C
M HH
~
yyv
c ~ a iw
vv. ~
. + A
e A ~ + +
.v
….: _ =
e
0
A
G
C
0 0
~ e Ee C

OC Br> Ro P de K p.: ~
_
~
‘i ~ hl ~ C
Y. Y Vi ~
I_ ~
CC N.
L. C. ‘O
I \

“, A
A
= ~ A
A um
um ~
Um ‘r ~’ ~ ~
C ~ E
Oww
.aa F
um
A3
Z
~ A
H _ ~ um
~
FJ
= g
ch _u um co
u m c é ~
m ~
V ~? . I
~ ~
C
Q c ~ ud

Scj ~ s ~ ‘~ ~ ~ ~ ~ shed’
21 422 ~ 7
WO 94/04168 -28- pct / ca93 / 00309
n ~ 0d mon m 1f1m mo ~ 0o ~ 0n o ~ fo ~ mm
eu nnmhmmnm de ~ t n if1 ~ t nnmn 111f1fvh1
w ~ no .fi ~ ~ 01d o rr pnp ~ p f ~ i0n co ~ op
~ ononn, nn nmnmp ~ nppnm
ao:
c1 ~ 0 n f ~ ap ~ m fb v1n v1 ~ ~ ~ ~ d ~ Oi0a
y ~ y1v1 ti1 o ~ po ~ tp nnp u1 ~ o
cc mmhm ~ tvt ~ fm ~ t mnmmm 1f ~ mmnnn
a j. ~ 10f ~ nnoo 1 ~ A h ~ ~ ~ a Wm mt ~ 1 ~ a0p eu om ~ nnn ~ n if1y ~ ~ f ~ f ~ 0d m ~! Mnmmm vt
ps ~ 1 ~ ny yt ~ 0 ~ c ~ 0o m ~ m ~ 0p d ~ f1 ~ mo H
1. O fv y ~ p ~ f ~ ph mnn v1a pm m
1,7n ~ nn r’n ~ ~ ~ d vt mmmmm ~ f mm ~ tif11f ~
ab d’1 ~ i! ~~ tn M ~ 01 ~~ ‘~ – 0; 1 ~ m
jm b ~ r ~ b ~ nmonmm
por ~~ p abmjppa
c7 0 ~ ~’ m ~ 0 ~ f ~ 0o if1n 1fw ~ 0o 1 ~ m ~ 0 p 10ii1o n tf1o m
um n ~ ~ m ~ ~ ~ ~ ~ 1 ‘~ mf1 ~ ~ 1f110f ~ .lf ~ f ~ ~ f11f1yn1
ho ~ ~ 0 ~ ~ ~ ~ OOO ~ ~ ~ ~ ~ 0
O 0 0 0 0 o 0 0 0 0 0 0 Ooooo 0 0

m ~ de.hfm! ~ 1 ~ p! ~ 0. 1 ~ ~ ~ mo v1m A
Hn ih n if1o 0 1f1if ~ .t ~ f 0
OOO 0 OOOO 0
OOOOOOO 0
C9
A
~ 1 J
c7
w
A ~ iaaaaii ~ A 4 A ~
l c4.li ~ ~ .lll ~ jjj ~ v >> >>>>
um ~. ~ m. ~. . m ~ www >>
v ~ v ~ v ~ ~ v w w w ww oopom .mmm como
A

A ~ ~ ~ ~ ~ ~
~ d ih ~ f ~ ~ ~ OJ NF ~ ~ NF ~ O.Hfb o
if1 m
~ l ~ ~ z ~ 7
wo 94/04168 2 9 PCT / CA93 / 00309
O ”
Nn
M + I + I
B al B ~ B ~ ~ ‘~ ~ ~ OO ~
~

oo’ d ‘n
onn
w \ \
-ri oo
rl oo

vv

~
m rl ‘q
+ i + i
qoo

01 O1 3
+ ~ A
_
E
o ..- i
n ~ ho + i + i +
‘~ 11 OOO A
A
OO I ~ O ~ O
~
O ~ O 01
B e

~ ~
W ~ GG)
GO ‘~’ 1 c WD O

v 0 A ~ O ~ O
AOOAOO ~ SR
Gi
fll w ni rl d ‘c1 u – d
i + i rl
f ~ oo
r-1 01
B
~
~ ~ ~ t
~

B OO I ~ B
N OO , ó

00 o ri p,
s ~ v ~ a ~
w e
p v. ~? ~ ‘
w? N, ~ a. ~ ~ ~ C ~
ri
b on ~ non -.- i? ~
+ i
~ b ~ ~ ~ ~ ro
B 0 0 oa ~
A ~ ~ ‘~ ~ ~ ~ ~ ~ n
A
A + ~ EE M -1 N C ~
D’
21 x2277
r, ~ l 94/04168 PCT / CA93 / 00309
– 30 –
(2) O paciente g foi tratado para uma recorrência local de câncer de
After Radiation. Ela recebeu tratamento de radiação em novembro de 1992. Administração de WPC semenaturar começou em dezembro de 4 de dezembro, de dezembro e 20 de janeiro de 1993, de 960 a 1310. A partir de 3 de fevereiro não havia recorrência e seus linfócitos foram 1370 e g / / H 3.1.
(3) O paciente h tinha recebido radioterapia para um tumor local. A administração de WPC desenfreado foi iniciada em dezembro de 16, 1992. Naquela época, os resultados dos testes foram os seguintes:
WBC 2700
Lym. 480
G / L 4.6
P / T 9.5 Resultados em 24 de dezembro foram:
CEA 11.0
WBC 4320
Lym. 910
G / L 3.7
P / T 10.7
em 20 resultados foram:
CEA 7.1
WBC 3420
Lym. 830
P / T 11.5
em 3 de fevereiro Os resultados foram:
CEA 5.2
WBC 3300
Lym. 860
G / L 2.5
P / T 11.5 Note-se que o progresso do paciente era bom.
(4) Paciente “eu” tinha recebido a radioterapia no MediaStinum, em cérebro cervical e total. A administração de WPC não-suportado foi iniciada em 1º de dezembro de 1992. Seus linfócitos são aumentados de 340 em 26 de novembro a 930 em 13 de janeiro. Seu rácio g / l diminuiu de 12,1 a 4,4 e a WBC aumentou de 45.1 para

PCT / CA93 / 00309
31
(que são incorporados por referência em sua totalidade)
1. Bouncous, G., Papenburg R, Rongshavn, P.A.L., Ouro,
P, Fleis $ ER, D. (: 1988) “Proteína dietética do soro de leite e inibe o desenvolvimento da malignidade da dimetil-hidrazina.” Clin. Investir. Med.
11: 213-217.
2. Papenburg R., Bouneus, G., Fleis $ er, D., Ouro, P.
(1990) “As proteínas dietéticas do leite inibem o desenvolvimento da malignidade induzida por dimetil-hidrazina.” Tumor: Biologia 11: 129-136.
3. Bourtourault, M., Bulão, R., 8amperez, 8., Jovan, P., (1991) “Effet des Proteines du Lactoserum Bovin
Sur La Multiplicação de Cellules Cancereuses – Cancereuses e Cancereuses | C.r. soc. Biol. 185: 319-323.
4. Laursen, I., Briand, P., Lykkesteldt, A.E., (1990)

“albumina sérica como um modulador de crescimento da linha de célula de câncer de mama humana MCF-7”. Anti-cancer
res. 10: 343-51.
5. Russo, A., de Gratf, W., Friedaan, N., Mitohell,
I., (1985) “Modulação seletiva de glutatione
níveis em células humanas normais versus tumorais e resposta diferencial subseqüente a quimioterapia
drogas “. Câncer res. 46: 2865-48.
6. Bazuahel, 8., WAAG, T., Farah, R., Batista, G.,
(1992) “Diferentes efeitos de OTZ no órgão GSH e níveis em tumores de rolamento de ratos”.
7. Villadsen, Patente Britânica 1.495.940 Publicado 21, 1977 e intitulado “Whey ativo anti-câncer e frações”.
8. John, A.m., Bell, J.M. Requisitos de aminoácidos de
O Rato Crescente. . Nutr. 106: 1361-1367, 1976
9. O mouse em pesquisa bioquímica, volume III, H.L.
Foster, J.D. Bmall, J.D. Fou, Editores, Acadêmico
Press, P.58, 1983 ..
10. Hoag, W.G., Dicrie, M. M. Nutrição em; Biologia de
O Mouse de Laboratório, E.L. Verde, editor,
McGraw-Hill, Nova York, pp. 39-43, 1966.
11. Ctjnningham, A., e Szenberg, A. Mais informações sobre a técnica da placa para detecção
wo 94/04168 21 ~ 2 2 7 7 PCT / CA93 / 00309
32
Único anticorpo formando células . J. Immun. Vol 14,
pg. 559-600, (1968)
12. Anderson, M.E. Tissue Glutationa: Em; Manual de métodos para pesquisa radical Oxvcten. C.r.c. Pressione,
317-329, 1985.
13. Glatt, H., Protic-Bablgic, M., Oesch, F.
mutagenicidade de glutationa e cisteína no teste de ames. Ciência 220: 961-962, 1983.
14. Taylor, Y.C., Brown, J.M. Elevação de níveis de glutationa intracelular após o esgotamento e sua relação com proteção contra radiação e alquilação. Farmacol. Ther. 39: 293-299, 1988.
15. Branco, c.w., jack80n, j.h., mcmurtry, i.f., repine,
j.e. A hipóxia aumenta o ciclo redox de glutatione e protege os pulmões de ratos contra oxidantes. J. Appl.
Physiol. 65: 2607-261EI, 1988.
16. Ander80n, m.e., Mei8ter, A. Transporte e Utilização direta de Gama-Glutamilcyst (E) Ine para Síntese de Glutationa. Proc. Natl. ACAD. Ci. U.
S.A. 80: 707-711, 1983.
17. William80n, J.M., Boettcher, B., Meibter, 11.
Sistema de entrega de cisteína intracelular que protege contra toxicidade, promovendo gsh e síntese. Proc. Natl. ACAD. Ci. U.S.A. 79: 6246-
6249, 1982.
18. Pori, R.N., Mei8ter, Fir. Transporte de glutatione
como gama-glutamilcylester, em fígado e rim. Proc. Natl. ACAD. Ci. U.S.A. 80:
5258-5260, 1987.
19. Ricbie, J. P., Mills, B.J., Lang, C.LH. Correção de uma capacidade de glutationa no mosquito envelhecimento e aumenta sua longevidade. Proc. SOC. Exp. Biol.

Med. 184: 113-117, 1987.
20. Fernandez-Checa, J.C., 00L ~ Tenb, M., Raplowitb. Efeitos da alimentação crônica de etanol no rato
Glutatione Hepatocyte. J. Clin. Investir. 83:
1247-1252, 1989.
21. LAD’FERHDRG, B. 8., Mitchell, J. R.
doses terapêuticas de acetaminofeno estimulam o volume de negócios de cisteína e glutationa no homem. J.
hepatol. 4: 206-211, 1987.
WO 94/04168 214 2 2 7 ‘~ ~ ~. PCT / CA93 / 00309
33
22. Meister, A., Anderson, M.e. Glutationa. Ann.
Rev. Bloch. 52: 711- 760, 1983.
23. Merhail-Ishar, R., Hudson, N., TBAO, M.B., Hatibt,
G. Enzimas metabolizantes de drogas no câncer de cólon humano:
implicações para terapia. Câncer res. (Na imprensa),

24. Lewib, LL.D., Hicrbon, I.D., Rob80n, C.n., Harris, A.L., et al. P.n.a.s. 85: 8511-8515, 1988.
25. Hamilton, T.C., Winrler, M.A., Looie, R.G., Batist,
G., et al. Aumentação de Adriamycin, Melphalan
Citoxicidade de cisplastina em resistência a drogas e linhas de células de câncer de ovário humano sensível por BSO, depleção de GS, mediadas. Biochem. Pharm. 34:
2583-2586, 1985.
26. Buzurare, R., Vibtica, H.P., VICICA, D.T.
Dechlorination of L- Fenilalanina Mostarda por células tumorais sensíveis e resistentes e sua relação com conteúdo de glutationa intracelular.
Biochem. Pharm. 32: 165-171, 1983.
27. Esbarre, W.E., J.L. Experimental
Carcinogênese do cólon induzido por 1,2- dimetil hidrázina-di HC1: valor como modelo de doença humana. J. SURG. Res. 21: 291-299, 1976.
28. Corhett, T.H., Gribwold, D.P., Robertb, G.J. Et al.
Avaliação de um único agente e combinação de agentes quimioterápicos no cólon de rato
carcinogênese. Câncer 40: 2650-2680, 1977.
29. Walstra, P. Jenn88. Química láctea e física.
Wiley J. Nitork, (ed.), P. 106, 1984.
30. Bwaibgood, m.e. características de fluidos comestíveis da origem animal: leite, em; Química de alimentos, O.R.
Fennema, (ed.). Marcel Dekker, p. 796, 1985.
31. Hounous G “Gold P: a atividade biológica de proteínas dietéticas indenaturadas: Papel de glutationa. Clin Invest Med 14: 296-309, 1991.
32. Bouncous G” Batist G “Gold P: Imunoenvancing
Propriedade de dietética Whey Protein em camundongos: Papel de Glutationa. Clin investir Med 12: 154-61, 1989.
33. Anderson Me, Meester A: Transportes e directo – utilização de gama -Glutazilcyst (E) ine para a síntese de glutationa. Proc Natl Acad Sci
80: 707-11 “1983.
wo 94/04168 PCT / CA93 / 00309
21 4.2277
34
34. Meister A: 5-Oxoproli; Nuria e outros distúrbios de Biossíntese de glutationa. Em: Stranbury JB,
Wymgaarden JB, Frederi.kson DS, Eds. Base metabólica
de doenças hereditárias 4º edn. McGraw Hill,
1978: 328-35
35. Hounous G. Rongsha ~ RN PAL, ouro. P: The
Imunoenchancing propriedade da proteína dietética de soro de leite e concentrado. Clin investir med 11: 271-8, 1988.
36. Hirai Y “Naxay 8. Rikuishi H” Ra ~ Rai R; Relatório:
Avaliação do aprimoramento imunológico de atividades imunocais. Otsuka Pharmaceutical Co. Ltd: Instituto de Tecnologia Celulares: 13 de dezembro, 1990, Osaka, Japão.
37. LINDERAON ME: Tecido: Glutationa: em: C.R.C.
Manual de métodos para pesquisa radical de oxigênio.
Boca Raton, Flórida: CRC Press, Inc., 1985: 317-29
38. Ietomi R. Um estudo sobre o papel de garnilócitos em anfitriões de rolamento de carcinoma.
– Ratio G / L Um novo indicador de host – JPN Soc.
Cancer.
25 / 662- 671/1990
39. Tllbuchi T., Boma T., Toner1,1 ia M., Romai T.,
Hashimoto T., Adachi M. “Redução de VX 2
Tumor transplantado por depleção de granulócitos usando a circulação extracorpórea em modelos de coelho .
Anticancer Res.
40. Hodnoub G, Rong881ilvn Pah, ouro P:
Influência do tipo de proteína em nutricionalmente adequado
dietas sobre o desenvolvimento da imunidade. Em:
Friedman M, Ed . Adsorção e utilização de amino
ácidos. Vol. II. Boca Raton, Flórida: CRC
Press, Inc., 1989: 2: L2-33
41. Boonoub, G., GERVAIB. , L ~ Mer V., Batibt G., ouro
P., “A influência da proteína dietética do soro de leite de
Tecido Glutationa e as doenças do envelhecimento.
Clin. Investir. Med. 12: 343-349, 1989.
42. Richie J.P.
O papel da glutationa em envelhecimento e câncer.
expert. Gerontologia 27: 615-626, 1992
43. Noelhe RJ, l ~ Awrence DL: Determinação de Glutationa em linfócitos e possivel associação de estado redox e capacidade proliferativa de linfócitos.Biochem J: 198: 571-9, 1981
zmzz7 ~ r
wo 94/04168 PCT / CA93 / 00309
44. Fidel08 RR, Tsan MF: Aprimoramento na intracelular
glutatione promove a ativação de linfócitos de
Mitogógeno. Cell Immunol 97: 155-63, 1986.
45. GOOGEROT-POCIDALO MA, Fay M, Roche S: Mecanismos
pelo qual lesão oxidativa inibe a resposta proliferativa dos linfócitos humanos a PHA, Efeito do Composto Tiol 2-Mercapto-etanol.
Imunologia 64: 281-8, 1988.
46. Boonoub G., Letourneau L., Rongshsh1 ~ Vn P.L ~. L.,
“influência do tipo de proteína dietética no sistema imunológico de ratos.

Deixe uma resposta

O seu endereço de email não será publicado. Campos obrigatórios marcados com *